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摘要：目的:觀察針刺對大鼠酒精戒斷焦慮樣癥狀的zhi療作用，探究針刺zhi療大鼠酒精戒斷焦慮樣癥 狀的作用機制。方法：選取健康的SD大鼠，隨機分組，分為空白組、模型組、三陰交組、足三里組、電針 兩穴（三陰交+足三里）組、針刺兩穴陰交+足三里）組，連續腹腔注射酒精（ethanol，Eth) 28 d，制備酒 精成癮模型，撤酒精3 d，制備酒精戒斷模型，撤酒精期間分別針刺相應穴位進行zhi療，針刺3 d，高架十 字迷宮（EPM)測其焦慮行為，ELISA測海馬中促腎上腺皮質ji素釋放ji素、環磷酸腺苷濃度。結果:與 空白組比較，酒精戒斷大鼠停留在開放臂的次數和時間明顯減少（P<〇.〇5)，海馬中cAMP、CRH的濃度 明顯升高（P<〇. 01);與模型組相比較，電針兩穴組和針刺兩穴組在EPM開放臂的的停留次數、時間明 顯地增加（P<〇.〇5)，海馬中cAMP、CRH的濃度明顯降低（P<0.01)，而單穴位組對各檢測指標的作用效 果不明顯（P>0.05)$結論：針刺能緩解酒精戒斷焦慮征大鼠的焦慮，其抗焦慮的作用機制可能與調節 大鼠腦內海馬組織中cAMP-CRH相互作用有關。
關鍵詞:針刺;焦慮;酒精戒斷;促腎上腺皮質ji素釋放ji素;環磷酸腺苷
實驗儀器
高架十字 迷宮:上海欣軟信息科技有限公司
行為學指標測試
實驗室內光線昏暗并保持恒亮，室溫24°C，保持 安靜。將每只大鼠置于高空十字架（EPM)的正中央 釋放，每只大鼠測試時間為5 min。每一只動物完成測 試后，清理糞便，并對裝置用酒精進行*清潔消du。
測試指標:進入到開放臂次數（0E):即進入到任 ¥開放臂的次數，以大鼠4個爪均進入到臂內開始，中 途有1個爪從該臂中*撤出，視為該次進入活動完 成;進入到開放臂時間（0T):進入到開放臂停留的時 間，單位:秒U);進入到閉合臂次數（CE):即進入到任 一閉合臂的次數，以大鼠4個爪均進入到臂內開始，中 途有1個爪從該臂中*撤出，視為該次進入活動完 成;進入到閉合臂時間（CT)，進入到閉合臂停留的時 間，單位:秒（s)。由以上指標分別計算出：①進開放 臂次數比例〇E% = OE“OE+CE) xl〇〇%;②開放臂停 留時間 t匕例 〇T% = OIV(OT+CT) xl〇〇%
討論
焦慮征大多是因為臟腑功能失調、氣機失常而導 致神志不安，足M里是足陽明胃經合穴，f陰交是肝、 腎、脾經的交會穴，這兩個穴位既能調節所屬臟腑的經 氣，同時又針對了焦慮征的病理特點進行zhi療。近年 來，三陰交、足S里作為zhi療焦慮征的主要穴位，受到 廣大學者的關注。有實驗證明，電針三陰交可緩解自 然更年期大鼠的焦慮行為[6]，針刺足三里可減輕hai洛 因戒斷后所產生的焦慮癥狀，且療效穩定[7]。本實驗 中，我們選取了$陰交和足三里進行針刺zhi療，觀察到 通過同時針刺這兩個穴位可明顯緩解酒精戒斷所產生 的焦慮癥狀，由此我們猜測針刺這兩個穴位可能存在 相互作用而使zhi療效果得到加強。單穴位的zhi療效果 并未如相關文獻中所了解的那么顯著，這可能是由于 針刺的天數和時長不同所導致。電針療法是應用電針 儀輸出脈沖電流，通過毫針作用于經絡穴位以達到治 療ji病目的的一種方法，它將毫針的刺激和電生理的 效應相結合，這種方法不僅可以提高針刺的zhi療效果， 同時還增加了針刺的zhi療范圍，加強了針刺疏通經絡 的作用[8]。有文獻報道[9]，電針zhi療焦慮征的效果與 抗焦慮藥wu的zhi療效果相當，且避免了藥wu所帶來的 依賴性等副作用。在本研究中，多項實驗結果也證實 了電針療法較普通針刺確有更好的療效。
大量的研究結果顯示，當機體受到內外環境的刺 激時，應激反應會表現出一系列的神經***物質的 變化，主要表現為HPA軸的興奮。下丘腦室旁核是HPA-神經***軸的中qu位點，CRH則是HPA軸激 活的關鍵性物質。適量的CRH的增多可使機體處于 興奮的狀態，但CRH的含量過高時，則可引起適應性的機制障礙，進而引發多種癥狀的發生，其中包括焦 慮、抑郁等。有研究表明，在應激刺激下，CRH的濃度 以及CRH mRNA的表達均顯著增加[1()]。在焦慮癥狀 中所觀察到的ji素含量的變化主要是由CRH的過度 分泌所導致[11]。新近研究表明，CRH的受體拮抗劑 可作為抗焦慮以及抗抑郁的神經藥理學zhi療方法[12]。 由本實驗結果我們也觀察到，酒精戒斷焦慮征大鼠的 海馬中CRH的濃度較空白組大鼠均増加，經針刺zhi療
后，其數值又下降至正常水平，由此證實了，CRH在焦 慮的發生中占有重要的地位。
焦慮征受多種基因和多種環境因素的調控，目前 發現其可能通過一系列的信號轉導級聯反應進行調 控。有研究表明，與G蛋白相偶聯的cAMP信號傳導 通路的異常與焦慮密切相關，這一論證從我們的實驗 結果中得到了證實，酒精戒斷大鼠的cAMP的濃度升 高，針刺zhi療后得到緩解。cAMP是體內比較重要的 第二信使，它對多種神經遞質的功能發揮起調節作用。 近年來，有大量的研究結果證實，cAMP依賴的PKA 信號通路在酒精依賴的形成過程中具有重要的作用。 環磷腺苷效應元件結合蛋白（CREB)作為PKA重要 的下游信號蛋白，在藥wu的成癮中也起著尤為重要的 作用，因此，近年，CREB在酒精成癮的相關研究中成 為又一備受關注的研究熱點。CREB通過結合cAMP 效應元件（CRE)調節基因的轉錄，CRE是在各種基因 調節區域中的順式增強子，CRH基因的上游調節區中 存在CRE序列，而且已經證實，CRE的功能與CRH的 轉錄活性密切相關，由此為我們的實驗結果提供證據： 針刺抗焦慮的作用可能通過調節cAMP-CRH相互作 用，終使酒精戒斷焦慮征得到緩解。同時由本實驗結 果證實了 cAMP、CRH之間可能確存在某種聯系，共同 調節酒精戒斷焦慮征的發生。
綜上所述，本實驗探究了針刺可緩解酒精戒斷期 間的焦慮樣行為，初步證實針刺可能通過cAMP-CRH 相互作用來緩解酒精戒斷焦慮樣癥狀，為針刺療法開 發成為防治酒精復飲的有效zhi療手段提供實驗和理論 依據，也為綜合利用中醫療法zhi療其他du品成癮提供強有力的實驗支持。
